一款具有多孔氮化硅膜的µ-Slide載玻片，可用于實(shí)時(shí)觀察流動(dòng)或靜態(tài)條件下的細(xì)胞侵襲、遷移以及細(xì)胞相互作用的可視化的“ transwell ”

產(chǎn)品特點(diǎn)：

?* 透過(guò)薄而多孔的薄膜獲得##的光學(xué)性能

* 有著廣泛的應(yīng)用，細(xì)胞可完全粘附到頂部-基底

* 對(duì)于不同細(xì)胞類型有多種孔徑大小可以選擇

應(yīng)用：

1. 流動(dòng)狀態(tài)下跨內(nèi)皮細(xì)胞遷移

2. 2D或3D凝膠內(nèi)細(xì)胞層的共培養(yǎng)和傳輸分析

3. 頂部-基底細(xì)胞極性分析

4. 頂部-基底梯度的細(xì)胞屏障模型分析

5. 細(xì)胞遷移分析（例如，用于研究腫瘤侵襲或轉(zhuǎn)移）

在µ-Slide ibiPore IV型膠原涂層3µm孔徑中人類內(nèi)皮細(xì)胞的免疫熒光染色，相位對(duì)比度、DAPI（藍(lán)色）、VE鈣粘蛋白（綠色）和F肌動(dòng)蛋白（紅色）的疊加圖像。

 技術(shù)特點(diǎn):

1.SiMPore的微孔氮化硅膜

2.中間具有多孔光學(xué)膜的跨通道結(jié)構(gòu)

3.優(yōu)異的光學(xué)性能，堪比蓋玻片

4.孔徑大小0.5μm，3μm，5μm，8μm供選擇

5.中間膜0.4µm（400 nm）

6.使用工作距離>0.5mm的物鏡

7.與ibidi泵系統(tǒng)（流體剪切力系統(tǒng)）完全兼容

8.下部通道中明確的剪切力和剪切速率范圍（更多詳情請(qǐng)參見(jiàn)“應(yīng)用“欄中的《 AN11_Shear_stress》）

µ-Slide ibiPore SiN 工作原理

µ-Slide ibiPore SiN由插入兩個(gè)通道之間的水平多孔膜組成。上部通道是膜上方的靜態(tài)儲(chǔ)液池。下部通道是灌注通道，用于對(duì)附著在膜上的細(xì)胞施加限定的剪切應(yīng)力。上部通道和下部通道僅通過(guò)隔膜彼此連通。

多孔膜由氮化硅（SiN）制成，這種材料具有非常高的化學(xué)和機(jī)械穩(wěn)健性。400nm厚的氮化硅膜非常適合成像和顯微鏡觀察，沒(méi)有任何自發(fā)熒光或透明度問(wèn)題（如玻璃）。SiN材料可以直接用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，也可以選擇用ECM蛋白包被。

應(yīng)用建議：孔徑 & 孔密度

什么是孔密度

孔密度是指膜的空隙體積分?jǐn)?shù)。是孔隙的體積除以膜的總體積。下面的圖形為采用相同的放大倍數(shù)。

不同應(yīng)用的建議孔徑：

Intended Use 經(jīng)證實(shí)的應(yīng)用：

這些應(yīng)用已由ibidi研發(fā)團(tuán)隊(duì)或者我們的用戶進(jìn)行過(guò)試驗(yàn)。

Endothelial Barrier Assays 內(nèi)皮屏障分析

在膜的一側(cè)培養(yǎng)細(xì)胞單層。細(xì)胞可以在靜止或者流動(dòng)剪切力條件下培養(yǎng)。

Co-Culture and Cell Barrier Assays 共培養(yǎng)和細(xì)胞屏障分析

在膜的兩側(cè)分別培養(yǎng)單層細(xì)胞。通過(guò)這種方法可以進(jìn)行信號(hào)傳遞、共培養(yǎng)以及遷移實(shí)驗(yàn)（例如，分析藥物通過(guò)上皮或內(nèi)皮屏障的傳遞）。

Apical-Basal Cell Polarity Assays 頂端-基底端細(xì)胞極性分析

3D凝膠基質(zhì)中的化學(xué)因子可以導(dǎo)向在膜另一側(cè)培養(yǎng)的單層細(xì)胞的極性發(fā)生。

Potential Use 潛在應(yīng)用：

 Trans-Membrane Migration in 2D/2D 跨膜遷移

 在膜的一側(cè)培養(yǎng)單層細(xì)胞。可以觀察懸浮的白細(xì)胞在流動(dòng)狀態(tài)下的滾動(dòng)、粘附以及侵襲情況。

Cell Transport in a 3D Gel Matrix 細(xì)胞在3D凝膠基質(zhì)中的傳遞

 3D凝膠基質(zhì)中的細(xì)胞遷移：在流動(dòng)狀態(tài)下，觀察白細(xì)胞的滾動(dòng)、粘附以及向3D凝膠基質(zhì)中腫瘤細(xì)胞方向的遷移情況。

Application Examples 應(yīng)用實(shí)例

 MDCK和NIH-3T3細(xì)胞的相差顯微鏡觀察 

Madin-Darby犬腎（MDCK，左）和NIH-3T3（右）細(xì)胞在µ-Slide ibiPore SiN，孔徑0.5µm的玻片中，無(wú)蛋白質(zhì)包被。接種后，將細(xì)胞在靜態(tài)條件下在培養(yǎng)箱中保持20小時(shí)。相差顯微鏡，4倍物鏡。請(qǐng)注意，這張圖像中的中心多孔區(qū)域看起來(lái)更暗，因?yàn)?.5µm的孔隙無(wú)法用低分辨率物鏡分辨。

流動(dòng)條件下HUVECS的相差顯微觀察

人臍靜脈上皮細(xì)胞（HUVEC）在µ-Slide ibiPore SiN中，孔徑3µm的玻片中，有纖連蛋白包被。將細(xì)胞接種并在具有ibidi泵系統(tǒng)/流體剪切力系統(tǒng)的流動(dòng)條件（10達(dá)因/cm²）下在培養(yǎng)箱中保持12小時(shí)。固定后的相位對(duì)比顯微鏡，10倍物鏡。

流動(dòng)下HUVECs F肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架的熒光顯微鏡觀察

 人臍靜脈上皮細(xì)胞（HUVEC）在µ-Slide ibiPore SiN，孔徑5µm玻片中的免疫熒光染色，有纖連蛋白包被。將細(xì)胞接種并在具有ibidi泵系統(tǒng)/流體剪切力系統(tǒng)的流動(dòng)條件（10達(dá)因/cm²）下在培養(yǎng)箱中保持12小時(shí)。綠色：肌動(dòng)蛋白（鬼筆肽），藍(lán)色：細(xì)胞核（DAPI）。熒光顯微鏡，20倍物鏡。

選擇指南：ibidi 跨膜分析實(shí)驗(yàn)解決方案

 參考文獻(xiàn):

Salvermoser, Melanie, et al. "Myosin 1f is specifically required for neutrophil migration in 3D environments during acute inflammation." Blood, The Journal of the American Society of Hematology 131.17 (2018): 1887-1898. 10.1182/blood-2017-10-811851

Rohwedder, Ina, et al. "Src family kinase-mediated vesicle trafficking is critical for neutrophil basement membrane penetration." Haematologica (2019). 10.3324/haematol.2019.225722

 Non-Recommended Applications 不建議的應(yīng)用

因技術(shù)原因，本產(chǎn)品不適用于以下應(yīng)用，應(yīng)避免使用.

本產(chǎn)品不適用于：

1.上通道灌注

2.兩個(gè)通道的灌注

3.跨膜流動(dòng)

4.篩選應(yīng)用